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生物緩沖液的配置及保存方法
更新時間:2019-08-06   點擊次數(shù):3318次
   PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用為廣泛的一種生物緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價陽離子。

  PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。

  原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在適條件下參與生物反應,所以使用PBS是。

  PBS也不是的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持的條件保證生物活性物質(zhì)保持其完整的特性。

  生物緩沖液的配制方法

  1.含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:

  2.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),(KCl),吐溫-20 ,加水。

  3.PBS:Phosphate Buffered Saline

  4.PBS 1L配方pH7.4:

  5.磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.24g,

  6.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.44g,

  7.氯化鈉(NaCl):8g,

  8.(KCl):0.2g,

  9.加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L

  保存方法

  加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。

  PBS緩沖液(pH7.2~7.4):

  KH2PO42mM

  Na2HPO4 8mM

  NaCl 136mM

  KCL 2.6mM

  PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。

  1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來配置緩沖液,用于其它用處。

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