NobleRyder蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型
NobleRyder蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型液體試劑NobleRyder 蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型液體試劑 D5806-2×100mlNobleRyder 蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型液體試劑 D5806-2×500ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
蘇mu素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色,簡(jiǎn)稱 HE 染色,是病理學(xué)常規(guī)制片中最基本的染色方法,應(yīng)用極其廣泛。蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價(jià)的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細(xì)胞核染色。在病理診斷、教學(xué)和科研工作中,常用 HE 染色對(duì)正常組織和病變組織進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察。對(duì)于確定或鑒別病變組織、細(xì)胞中出現(xiàn)的某些異常物質(zhì)與特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學(xué)方法、免疫組織化學(xué)方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎(chǔ)上進(jìn)行的。在 HE 染色的組織切片中,細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對(duì)比,易于觀察分析。
NobleRyder蘇mu素伊紅染色液中,蘇mu素染色液采用NobleRyder自主研發(fā)的配方,由進(jìn)口的高純度蘇木精、氧化劑等組成,不含氧化gong、甲醇等有害物質(zhì),對(duì)細(xì)胞核染色效果好。其特點(diǎn)是不易產(chǎn)生沉淀和金屬;應(yīng)用范圍廣,可以用于人、動(dòng)物、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細(xì)胞的染色等;蘇mu素染色液可以重復(fù)使用。
NobleRyder蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型液體試劑
染色原理:
1、 細(xì)胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是 DNA,在 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
2、 細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關(guān)。當(dāng)染色液 pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在 HE 染色中常用 1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇mu素染色后,必須用 1%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇mu素染料脫去,再進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
4、 返藍(lán)作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長(zhǎng)。
產(chǎn)品組成:
編號(hào) 名稱 | D5806 | D5806 | Storage |
試劑(A): NobleRyder蘇mu素染色液 | 100ml | 500ml | RT避光 |
試劑(B):伊紅染色液 | 100ml | 500ml | RT避光 |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍(lán)化液,如稀氨水、碳酸li溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲quan
操作步驟(僅供參考):
(一) 石蠟切片染色
1、 切片脫蠟至水
① 二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。
② (可選)無水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。
③ 95%的乙醇 3~5min
④ 90%的乙醇 3~5min
⑤ 80%的乙醇 3~5min
⑥ 自來水或蒸餾水沖洗 1~3min
2、 染色
① NobleRyder 蘇mu素染色液染色 5~8min
② 自來水或蒸餾水沖洗 5~10s
③ (可選)鹽酸乙醇分化 2~5s
④ 自來水沖洗 20~30s
⑤ 藍(lán)化液返藍(lán) 20~40s
⑥ 自來水沖洗 30~60s
⑦ 伊紅染色液染色 3~5min
⑧ 自來水沖洗 1~5s
2、 脫水、透明、封固
① 80%乙醇 10~20s
② 90%乙醇 10~20s
③ 95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④ 無水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤ 二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。
⑥ 中性樹脂封片。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色;細(xì)胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質(zhì)等呈深淺不一的紅色;角蛋白、紅細(xì)胞等呈明亮的橙紅色。
(二) 冰凍切片染色
1、乙mi-乙醇混合固定液 5~10s
2、自來水沖洗 2~5s
3、NobleRyder 蘇mu素染色液滴染1~2min(可加熱至50℃)。
4、自來水沖洗 2~5s
5、(可選)鹽酸乙醇分化 2~5s
6、自來水沖洗 2~5s
7、藍(lán)化液返藍(lán) 2~5s
8、自來水沖洗 5~10s
9、伊紅染色液染色 2~5s
10、自來水沖洗 1~2s
11、80%的乙醇 1~2s
12、95%的乙醇 1~2s
13、無水乙醇 2~5s
14、苯fen二甲苯(1:3) 2~5s
15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s。
16、中性樹脂封片
備選方案:
1、 無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 2~3min.
2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色;細(xì)胞質(zhì)、纖維呈紅色。
(三)細(xì)胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自來水沖洗 2 次,每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,作用時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色;細(xì)胞質(zhì)、纖維呈紅色。
注意事項(xiàng):
1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
2、 鹽酸乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠,以便徹di清洗酸。
3、 乙mi-乙醇混合固定液是由乙mi和95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。
4、 冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
5、 藍(lán)化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍(lán)液或 0.1~1%碳酸li溶液。
6、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:12個(gè)月有效。
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