2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
本產(chǎn)品包含Long Taq DNA Polymerase、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，濃度為2×，擴(kuò)增速度（5-10s/kb）是普通Taq mix速度的6倍，保真度是Taq酶的3倍， 適用于擴(kuò)增各種長達(dá)10Kb的DNA模板！PCR產(chǎn)物3’端帶A頭，純化后可直接用于TA載體克隆。2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2× Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
目錄號：71115
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 71115-05 | 71115-0100 |
2× Long Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存條件
-20℃保存，有效期2年。經(jīng)常使用，可置于4°C保存，有效期3個(gè)月。
產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品包含Long Taq DNA Polymerase、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，濃度為2×，擴(kuò)增速度（5-10s/kb）是普通Taq mix速度的6倍，保真度是Taq酶的3倍， 適用于擴(kuò)增各種長達(dá)10Kb的DNA模板！PCR產(chǎn)物3’端帶A頭，純化后可直接用于TA載體克隆。
本產(chǎn)品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳；也可經(jīng)過純化處理，以用于酶切、連接、測序等后續(xù)操作。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 高產(chǎn)：產(chǎn)量是普通 Taq 酶的 2 倍！
2. 高效：延伸速度 5-10s/kb，一般 0.5 小時(shí)完成 PCR！
3. 高成功率：對于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果！
2 × Long Taq PCR Master Mix 使用說明：
一、 配制 PCR 反應(yīng)體系：(于冰上配制)
Component | 20μlReaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×Long Taq PCR Mix | 10 μ | 25 μ | 1 × |
Forward Primer(10 μM) | 0.8 μ | 2 μl | 0.4 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μl | 2 μ | |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
參考模板用量（50 μl 反應(yīng)體系）：
質(zhì)粒：0.1-10 ng；細(xì)菌基因組：10-100 ng；人類基因組：0.1-1 μg；cDNA：1-5 μl 。
二、建議 PCR 循環(huán)條件：
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 15 seconds |
30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 60 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事項(xiàng)：
擴(kuò)增長片段，引物一般終濃度為 0.3-1μM，長度最好為 27-36bp；退火溫度一般在 65℃-70℃，使用 2 步擴(kuò)增法，即退火/延伸合為一步；如果設(shè)計(jì)的引物在 20bp 左右，則使用 3 步擴(kuò)增法為好。擴(kuò)增效果不佳時(shí)，還可加入 DMSO 到終濃度 2-4%。
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
